大鼠酰基輔酶A;膽固醇酰基轉移酶（ACAT）elisa檢測試劑盒科研

更新時間：2017-06-16

簡要描述：

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大鼠酰基輔酶A;膽固醇酰基轉移酶(ACAT)elisa檢測試劑盒科研簡稱：Rat ACAT elisa kit
規(guī)格：48孔板（T）/96孔板（T）
品牌：RENJIE
性狀：液體(盒裝)
保存條件：2-8℃（長期不用，部分試劑需-20℃條件一下）
運輸：快遞（生物干冰或冰袋運輸）2-3天。

大鼠酰基輔酶A;膽固醇酰基轉移酶(ACAT)elisa檢測試劑盒科研
說明書：隨貨發(fā)送，也可直接在線銷售索取
測試種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期：2-8℃,避光保存:6個月。
產品產地：進口/國產
品牌：自主研發(fā)/進口原裝
產品價格：*，洽談！試劑盒
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
產品價格：*,洽談

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大鼠酰基輔酶A;膽固醇酰基轉移酶(ACAT)elisa檢測試劑盒科研使用注意事項：
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9.不能使用過期產品。
10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

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在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1）固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃?18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg/ml。
（3）酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
（4）酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同，用量少時，可使用分裝，前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線zui高點OD?值均在2.0±0.2，零孔的OD?值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復性好，板內、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測，避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30),?方便試驗操作者準確地做稀釋工作，保證實驗結果的重復性