小鼠D-乳酸脫氫酶（D-LDH）ELISA試劑盒檢測方法

發布時間：2017-08-23 點擊次數：1741次

-小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒

Mouse D-LDH ELISA Kit

Product Introduction

中文名稱：小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒

英文簡稱：Mouse D-LDH ELISA Kit

規格：48T/96T

檢測范圍：1.5 U/L – 48 U/L

zui低檢測限：0.1 U/L

檢測方法：雙抗夾心法

檢測樣本：血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿及相關生物液體

名稱	96孔	48孔	備注
微孔酶標板	8孔×12條	8孔×12條	2-8℃
標準品	6支	6支	-20℃（用不完）
樣本稀釋液	6mL	3mL	按說明書進行稀釋
檢測抗體-HRP	10mL	5mL	2-8℃
底物A	6mL	3mL	2-8℃
底物B	6mL	3mL	2-8℃
終止液	6mL	3mL	2-8℃
20×濃洗滌緩沖液	25ml	15ml	無
說明書	1份	1份	無
自封袋	1個	1個	無
封板膜	2張	2張	無

需自備的設備及試劑：

1.450±10nm濾光片酶標儀（建議儀器使用前預熱）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.

3.Eppendorf 移液器.

4.蒸餾水或去離子水.

5.脫脂棉吸水紙.

6.37℃恒溫箱.

7.100ml和1000ml量筒.

8.準備若干個標準品稀釋管.

試劑盒的儲存及有效期：

未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

實驗原理：

將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

精密度：

精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV（%）=SD/mean×100

批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批內差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

穩定性：

經測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。

為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

友情提醒：

試劑盒使用完畢后，請妥善處理相關耗材，避免環境污染！

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